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    蛋白提取纯化注意事项
    发布日期：2020-09-02
    浏览次数：5344

    在进行任何一种蛋白质纯化的时候，都要时刻注意维护它的稳定性，保护它的活性，有一些通用的注意事项需要牢记，它们包括：

    1、操作尽可能置于冰上或者在冷库内进行。

    2、不要太稀，蛋白浓度维持在μg/mL～mg/mL。

    3、合适的pH，除非是进行聚焦层析，所使用的缓冲溶液pH避免与pI相同，防止蛋白质的沉淀。

    4、使用蛋白酶抑制剂，防止蛋白酶对目标蛋白的降解;在纯化细胞中的蛋白质时，加入DNA酶，降解DNA，防止DNA对蛋白的污染。

    5、避免样品反复冻融和剧烈搅动，以防蛋白质的变性。

    6、缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环境。

    7、在缓冲溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫苏糖醇)(或β-巯基乙醇)，防止蛋白质的氧化。

    8、加1~10mmol/LEDTA金属螯合剂，防止重金属对目标蛋白的破坏。

    9、使用灭菌溶液，防止微生物生长。提供植物有机养分j9游会真人游戏第一品牌、无机养分j9游会真人游戏第一品牌、植物常量元素j9游会真人游戏第一品牌、植物微量元素j9游会真人游戏第一品牌、植物常量元素j9游会真人游戏第一品牌 、植物元素化学形态分析、植物亚细胞组分元素分析、植物金属元素分析等。

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